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上海罗氏转染试剂梯度

来源: 发布时间:2023年01月04日

用LipoD293™体外DNA转染试剂(Ver.II)(上图)和受欢迎的品牌产品Invitrogen公司的293fectin™(下图)转染pEGFP-C1质粒到HEK293细胞中。转染24小时后,细胞的尼康Eclipse荧光显微镜DIC成像图(左侧)和荧光成像图(右侧)。对悬浮HEK293F产生蛋白质效率的比较/30毫升的293F细胞分别使用LipoD293™试剂、293fectin、Xfect和Fugene6等转染试剂按照生产商的标准转染步骤将pEGFP-6xHis质粒导入细胞表达,用量为LipoD293™试剂,20微克,所有其他三种转染试剂均使用30微克质粒DNA。转染的细胞类型可简单分为两大类,连续细胞系和原代细胞.上海罗氏转染试剂梯度

基于磷酸钙成分的转染试剂,其主要作用原理是与DNA通过沉淀反应形成磷酸钙-DNA复合物,粘附到细胞膜表面,借助内吞作用进入细胞质。pH值,钙离子浓度,DNA浓度,沉淀时间,细胞孵育时间乃至各组分加入顺序都可能对结果产生影响,因此实验条件摸索和优化时间较长,且重复性不佳。基于脂质体的转染试剂包括中性脂质体和阳离子脂质体两种。中性脂质体是利用脂质膜包裹DNA,借助脂质膜将DNA导入细胞膜内。目前应用比较***的是带正电的阳离子脂质体转染试剂,DNA并没有预先包埋在脂质体中,而是带负电的DNA自动结合到带正电的脂质体上,形成DNA-阳离子脂质体复合物,从而吸附到带负电的细胞膜表面,经过内吞被导入细胞。此方法操作简单,重复性好,在体外转染中有很高的效率,但具有一定的细胞毒性,可能会干扰细胞的代谢。且活性受血清影响,需要去除血清。上海动物细胞转染试剂价格转染后6h观察细胞状态,并更换培养基,继续培养24 h后收取细胞,用PBS洗涤3次以上,以备RNA抽提。

LipofectamineRNAiMAX转染试剂是先进、高效的siRNA输送解决方案。目前尚无其他siRNA转染试剂能够在***的细胞系中(包括常见细胞类型、干细胞、原代细胞以及历来难转染的细胞类型)提供如此简便、高效的siRNA输送效果。高效可在低siRNA浓度下获得优良的转染效果相对于其他的siRNA转染试剂,LipofectamineRNAiMAX转染试剂可以获得更佳的基因***效果。同在10nM和1nMp53siRNA下,LipofectamineRNAiMAX转染试剂实现了更高的有效***细胞/未转染细胞比率,超过其他RNAi试剂。

细胞转染过程:X-tremeGENE9DNA转染试剂简介:X-tremeGENE9DNA转染试剂是脂质和其它成分混合而得的一类多组份试剂,溶于80%乙醇中,经0.2μm滤膜过滤,然后封装于玻璃小瓶中,适用于细胞分析的多种实验。优势:1.具有细胞毒性极低、转染后细胞存活率高,生成可信任的生理学相关数据。2.操作简便、节省时间,只需对X-tremeGENE9DNA转染试剂进行简单稀释,再与质粒DNA共同孵育,即可直接向细胞添加反应混合物(有无血清均可)。3.对于常用细胞无需进行费时费力的优化工作。采用siRNA转染试剂可以将siRNA轻松导入细胞内。

LipoFectMax™转染试剂LipoFectMax™转染试剂具有以下几个优点:高转染效率,适用于多种细胞系对细胞毒性低适用于DNA和RNA的转染转染前无需去除细胞培养基或血清转染后无需清洗细胞或更换培养基转染效率高,适用于多种细胞系图1.LipoFectMax™转染试剂以绿色荧光蛋白(GFP)表达质粒转染几种常见细胞系,通过检测GFP信号比较转染效率。细胞毒性低图2.LipoFectMax™,LipoFectamine®2000及LipoFectamine®3000分别对A549细胞进行转染操作,通过计算转染后的细胞存活率比较细胞毒性。连续细胞系具有无限增殖的潜能,通常要比原代或有限细胞更易处理.上海质粒转染试剂价格

转染复合物制备完成; 混匀后室温下孵育15-20分钟,直接取10μL加入已铺好细胞的孔中.上海罗氏转染试剂梯度

在多种不同类型细胞中基因敲除效率超过90%。2.高灵活应用,同一试剂可用于siRNA和质粒共转染的基因沉默实验。3.细胞毒性低,结果相关性好,确保所观察到的细胞效应是由转染的siRNA而非转染过程本身介导。4.兼容含血清或不含血清的培养基,转染前后均无需换液(如无血清培养基)。图4.X-tremeGENEsiRNATransfectionReagent用于4种细胞系的HPRT基因沉默实验。根据各试剂说明书建议的操作流程,或标准实验方法,将100nMHPRT特异性siRNA转染至4种细胞。通过LightCycler®h-HPRTHousekeepingGeneSet的荧光定量法评估基因沉默效率。结果显示用罗氏这款试剂在四种细胞中转染后基因沉默表现均表现优异。上海罗氏转染试剂梯度

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