细胞转染过程:X-tremeGENE9DNA转染试剂简介：X-tremeGENE9DNA转染试剂是脂质和其它成分混合而得的一类多组份试剂，溶于80%乙醇中，经0.2μm滤膜过滤，然后封装于玻璃小瓶中，适用于细胞分析的多种实验。优势：1.具有细胞毒性极低、转染后细胞存活率高，生成可信任的生理学相关数据。2.操作简便、节省时间，只需对X-tremeGENE9DNA转染试剂进行简单稀释，再与质粒DNA共同孵育，即可直接向细胞添加反应混合物(有无血清均可)。3.对于常用细胞无需进行费时费力siRNA脱靶效应会导致细胞死亡，并引起分析问题。病毒转染试剂分装
用LipoD293™体外DNA转染试剂（Ver.II）（上图）和受欢迎的品牌产品Invitrogen公司的293fectin™（下图）转染pEGFP-C1质粒到HEK293细胞中。转染24小时后，细胞的尼康Eclipse荧光显微镜DIC成像图（左侧）和荧光成像图（右侧）。对悬浮HEK293F产生蛋白质效率的比较/30毫升的293F细胞分别使用LipoD293™试剂、293fectin、Xfect和Fugene6等转染试剂按照生产商的标准转染步骤将pEGFP-6xHis质粒导入细胞表达，用量为LipoD293™试剂，20微克，所有其他三种转染试剂均使用30微克质粒DNA。上海脂质体转染试剂供应商并更换培养基，继续培养24 h后收取细胞，用PBS洗涤3次以上，以备RNA抽提。
胞因素用低代数的细胞293T细胞非常重要！！当然也要保证细胞状态特别好，没有细微污染，铺板均匀。饱满状态好的细胞才可以产生较高滴度的***哦！载体系统在实验中**常见的慢***载体系统有三质粒系统、四质粒系统，当然使用三质粒系统的小伙伴居多，一定要选择成熟商业化的载体系统！载体构建和质粒抽提纯化我们要注意是否构建时导致质粒载体重组或某个部件缺失，或污染别的质粒、杂物?中抽纯化是否污染?要养成同时做阴性对照的习惯：建议目的基因载体和阴性对照GFP载体是同一批，且建议每次包装都如此操作，要保证目的基因的表达载体构建纯化良好，质粒间比例得当，并且对质粒进行酶切验证。
.在多种不同类型细胞中基因敲除效率超过90%。2.高灵活应用，同一试剂可用于siRNA和质粒共转染的基因沉默实验。3.细胞毒性低，结果相关性好，确保所观察到的细胞效应是由转染的siRNA而非转染过程本身介导。4.兼容含血清或不含血清的培养基，转染前后均无需换液(如无血清培养基)。图4.X-tremeGENEsiRNATransfectionReagent用于4种细胞系的HPRT基因沉默实验。根据各试剂说明书建议的操作流程，或标准实验方法，将100nMHPRT特异性siRNA转染至4种细胞。通过LightCycler®h-HPRTHousekeepingGeneSet的荧光定量法评估基因沉默效率。结果显示用罗氏这款试剂在四种细胞中转染后基因沉默表现均表现优异。所见即所得——分享两款超好用的转染试剂,拯救你的细胞.
将胶质瘤干细胞（3105）接种至6孔板中，然后使用riboFECTCP转染试剂分别将5μl20μMBMPER、CXCL10和HOXA9siRNA转染进胶质瘤干细胞（DP3321、DP7857）中，48h后，qRT-PCR和westernblots检测siRNA***效率。结果发现DP3321中的siBMPER、siCXCL10和siHOXA9表达水平分别为46.32％、49.71％和43.64％，DP7857中的siBMPER、siCXCL10和siHOXA9表达水平分别为53.21％、47.46％和46.31％。将1.25μlTREM-1siRNA（20μm）和3μlriboFECTTMCPRegent在30μlriboFECTTMCPBuffer中混合以产生转染混合物。然后将混合物加入DMEM（siRNA浓度：50nM）中，与原代小胶质细胞培养48h。RT-PCR和westernblot分析检测转染效率。结果发现转染TREM-1siRNA后******了OGD诱导的TREM-1、p-SYK、SYK、CARD9、p-p65和NLRP3的上调。包括**常见的DNA，用于基因编辑的siRNA，能够更快表达蛋白的mRNA，CRISPR-Cas9甚至是体内转染。上海病毒转染试剂购买
转染试剂实现了更高的有效***细胞/未转染细胞比率，超过其他RNAi试剂。病毒转染试剂分装
转染是将外源核酸导入真核细胞的过程，是细胞和分子生物学研究的重要工具，也是大部分的生物和分子生物领域的科研党们绕不开的话题。然而常常听到的抱怨是"转染效率太低""转染完细胞全漂了""转染后忘记给细胞换液了"，真所谓辛辛苦苦实验N多回，一夜回到解放前……众所周知，影响转染成功的因素非常多，包括细胞质量、核酸质量、微生物污染、转染试剂等。各种细胞使用的转染条件都可能不同，现实中也并没有一种放之四海而皆准的方案。病毒转染试剂分装
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