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上海原代细胞转染试剂类型

来源: 发布时间:2022年12月22日

细胞转染如果以上都没有问题,那么******重要的环节就是慢***质粒转染293T细胞了,转染效果直接影响着出毒效率,那么一款好的转染试剂在此时就是至关重要了!在这里给大家推荐一款性价比超高的转染试剂,美国Polysciences家的PEIMAX40K!PEIMAX40K(也称为游离碱PEI22K)是一种功能强大,值得信赖且经济高效的瞬时转染试剂。在HEK293和CHO表达系统中,能在96孔板至100L生物反应器范围内提供始终如一高效的基因表达。越来越多的研究人员和公司使用PEI来替代其他类型转染试剂,以获得他们所需要的优势。相较于其他类型转染试剂,使用自行制备的PEI转染试剂可以使总转染成本降低高达40%左右。ThomasM,etal(2005)研究数据表明,去乙酰化的PEI40000(PolyethylenimineMAX40000)体外质粒DNA转染效率提高21倍,小鼠体内靶向效率达到10000倍,随之肺部特异疗效显示增强1500倍。mRNA细胞&***转染试剂来助力.上海原代细胞转染试剂类型

用LipoFectMax™转染Hela细胞,左图转染GFPcDNA,右图共转染GFPCDNA和GFP靶向siRNA。转染siRNA后可以从右图明显看到基因沉默。4适用于神经细胞的转染图4.用LipoFectMax™和LipoFectamine®2000分别对小鼠神经元细胞进行转染绿色荧光白蛋白(GFP),转染24小时后观察转染效果,LipoFectMax™转染效率(左图)比LipoFectamine®2000(右图)高5倍。LipoFectMax™转染试剂转染试剂操作流程细胞毒性低图2.LipoFectMax™,LipoFectamine®2000及LipoFectamine®3000分别对A549细胞进行转染操作,通过计算转染后的细胞存活率比较细胞毒性。上海原代细胞转染试剂类型无论有无血清、***存在均可获得很高的转染效率。

原代细胞直接分离自组织并在适当条件下增殖,因此,它们的形态学和生理特征和体内状态更为相似。但相对于连续细胞系,它们通常更难培养和转染。在经过***次传代培养之后,原代培养物变成了一种细胞系。源自于原代培养物的细胞系具有有限的寿命(即它们是有限细胞系),且随着传代的进行,具有比较高的生长能力的细胞逐渐占据支配地位,从而造成了细胞群内的基因型和表型接近一致的情形。相对来说,这一类细胞要比原代细胞使用起来更为方便,尤其是稳定转染的克隆传代。

.在多种不同类型细胞中基因敲除效率超过90%。高灵活应用,同一试剂可用于siRNA和质粒共转染的基因沉默实验。细胞毒性低,结果相关性好,确保所观察到的细胞效应是由转染的siRNA而非转染过程本身介导。兼容含血清或不含血清的培养基,转染前后均无需换液(如无血清培养基)。X-tremeGENEsiRNATransfectionReagent用于4种细胞系的HPRT基因沉默实验。根据各试剂说明书建议的操作流程,或标准实验方法,将100nMHPRT特异性siRNA转染至4种细胞,通过LightCycler®h-HPRTHousekeepingGeneSet的荧光定量法评估基因沉默效率。结果显示用罗氏这款试剂在四种细胞中转染后基因沉默表现均表现优异。研发合成的针对siRNA、microRNA、mimic、inhibitor、mRNA和shRNA等RNA的转染试剂。

用LipoD293™体外DNA转染试剂(Ver.II)(上图)和受欢迎的品牌产品Invitrogen公司的293fectin™(下图)转染pEGFP-C1质粒到HEK293细胞中。转染24小时后,细胞的尼康Eclipse荧光显微镜DIC成像图(左侧)和荧光成像图(右侧)。对悬浮HEK293F产生蛋白质效率的比较/30毫升的293F细胞分别使用LipoD293™试剂、293fectin、Xfect和Fugene6等转染试剂按照生产商的标准转染步骤将pEGFP-6xHis质粒导入细胞表达,用量为LipoD293™试剂,20微克,所有其他三种转染试剂均使用30微克质粒DNA。随后分离血清并检测FVII蛋白的水平(Biophen 显色检测)。上海原代细胞转染试剂类型

siRNA脱靶效应会导致细胞死亡,并引起分析问题。上海原代细胞转染试剂类型

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