胞因素用低代数的细胞293T细胞非常重要！！当然也要保证细胞状态特别好，没有细微污染，铺板均匀。饱满状态好的细胞才可以产生较高滴度的***哦！载体系统在实验中**常见的慢***载体系统有三质粒系统、四质粒系统，当然使用三质粒系统的小伙伴居多，一定要选择成熟商业化的载体系统！载体构建和质粒抽提纯化我们要注意是否构建时导致质粒载体重组或某个部件缺失，或污染别的质粒、杂物?中抽纯化是否污染?要养成同时做阴性对照的习惯：建议目的基因载体和阴性对照GFP载体是同一批，且建议每次包装都如此操作，要保证目的基因的表达载体构建纯化良好，质粒间比例得当，并且对质粒进行酶切验证。研发合成的针对siRNA、microRNA、mimic、inhibitor、mRNA和shRNA等RNA的转染试剂。上海慢病毒转染试剂
超级好用的siRNA和miRNA转染试剂——HiPerFect高效沉默低脱靶：HiPerFect是小RNA转染试剂，这种非脂质体的脂质分子可以在siRNA低至100pM浓度的条件下转染（推荐浓度是1nM-5nM）。保持高效基因沉默的同时降低脱靶效应，正是这一产品的精髓所在。除了siRNA，HiPerFect还能够用于miRNA模拟物和***剂的转染，满足miRNA功能分析的需要。操作简单，方便快速：HiperFect转染试剂的方便程度也是***的，甚至***之内可以完成再次接种、转染到检测结果！这对于高通量反应简直是求之不得的福音：转染前将细胞按比例接种到24孔培养皿中，培养基可以是含有***和血清的，在37度培养箱中保温。上海慢病毒转染试剂原代细胞直接分离自组织并在适当条件下增殖.
将胶质瘤干细胞（3105）接种至6孔板中，然后使用riboFECTCP转染试剂分别将5μl20μMBMPER、CXCL10和HOXA9siRNA转染进胶质瘤干细胞（DP3321、DP7857）中，48h后，qRT-PCR和westernblots检测siRNA***效率。结果发现DP3321中的siBMPER、siCXCL10和siHOXA9表达水平分别为46.32％、49.71％和43.64％，DP7857中的siBMPER、siCXCL10和siHOXA9表达水平分别为53.21％、47.46％和46.31％。将1.25μlTREM-1siRNA（20μm）和3μlriboFECTTMCPRegent在30μlriboFECTTMCPBuffer中混合以产生转染混合物。然后将混合物加入DMEM（siRNA浓度：50nM）中，与原代小胶质细胞培养48h。RT-PCR和westernblot分析检测转染效率。结果发现转染TREM-1siRNA后******了OGD诱导的TREM-1、p-SYK、SYK、CARD9、p-p65和NLRP3的上调。
细胞转染过程:X-tremeGENE9DNA转染试剂简介：X-tremeGENE9DNA转染试剂是脂质和其它成分混合而得的一类多组份试剂，溶于80%乙醇中，经0.2μm滤膜过滤，然后封装于玻璃小瓶中，适用于细胞分析的多种实验。优势：1.具有细胞毒性极低、转染后细胞存活率高，生成可信任的生理学相关数据。2.操作简便、节省时间，只需对X-tremeGENE9DNA转染试剂进行简单稀释，再与质粒DNA共同孵育，即可直接向细胞添加反应混合物(有无血清均可)。3.对于常用细胞无需进行费时费力的优化siRNA脱靶效应会导致细胞死亡，并引起分析问题。
对HepG2细胞转染效率的比较右图：使用以上转染试剂将GFP的cDNA（pEGFP-N3）按照生产商的提供的转染步骤转染到HepG2细胞（在胶原预处理的培养皿中培养）。在转染48小时之后，用流式细胞仪检测GFP阳性细胞（%）和荧光强度。左图：血清和***存在的条件下能提高LipoD293试剂（升级版）对在HepG2细胞的转染效率。通过三种不同的条件下转染HepG2细胞（生长在胶原处理的培养皿上）---无血清和***，10%血清和***的存在，转染5小时后换液和不换液。在经过***次传代培养之后，原代培养物变成了一种细胞系。上海pei转染试剂报价
MagTransf 磁转染试剂实现高效转染解析.上海慢病毒转染试剂
.在多种不同类型细胞中基因敲除效率超过90%。高灵活应用，同一试剂可用于siRNA和质粒共转染的基因沉默实验。细胞毒性低，结果相关性好，确保所观察到的细胞效应是由转染的siRNA而非转染过程本身介导。兼容含血清或不含血清的培养基，转染前后均无需换液(如无血清培养基)。X-tremeGENEsiRNATransfectionReagent用于4种细胞系的HPRT基因沉默实验。根据各试剂说明书建议的操作流程，或标准实验方法，将100nMHPRT特异性siRNA转染至4种细胞,通过LightCycler®h-HPRTHousekeepingGeneSet的荧光定量法评估基因沉默效率。结果显示用罗氏这款试剂在四种细胞中转染后基因沉默表现均表现优异。上海慢病毒转染试剂
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