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神经细胞转染试剂

来源: 发布时间:2022年04月24日

LNCap细胞的培养和传代严格由ATCC建议的操作步骤进行,与pBabe-hygro-SSeCKs(1.5ug)和pEGFP-N3(1:1,共1.0微克)共转染(6孔板中每孔的量),并用LipoD293™试剂(左图)和FugeneHD(右图)分别按照生产制造商的科学实验步骤进行转染。转染24小时后,用尼康Eclipse2000荧光显微镜检测GFP荧光,以此来评价转染效率。在血清和***的存在下,HepG2和SaoS-2细胞用pEGFP-N3和pSV-β-半乳糖苷酶DNAs分别转染达到95%的细胞融合。转染48小时后,分别通过Zeiss510激光共聚焦显微镜和β-半乳糖苷酶染色试剂盒检测效率。转染的细胞类型可简单分为两大类,连续细胞系和原代细胞.神经细胞转染试剂

在难转染细胞(原代大鼠动脉平滑肌细胞)转染效率的比较

图片由芝加哥大学肺和重症护理系的 Nickolai Dulin 博士友情提供

制备大鼠的动脉平滑肌原代细胞并用使用 LipoD293™试剂(左图)和 Lipofecatmine 2000(L2K, 右图)分别将 GFP 的 cDNA(pEGFP-N3)按照生产制造商的转染操作步转染至该细胞。转染 24 小时后,用尼康 Eclipse 2000 荧光显微镜检测 GFP 荧光,以此来评价转染效率。

对难转染细胞 LNCap 细胞转染效率的比较


在难转染细胞(原代大鼠动脉平滑肌细胞)转染效率的比较

图片由罗斯威尔公园**研究所(Roswell Cancer Institute)






神经细胞转染试剂用了这个转染试剂,慢***再也不用怕转不进去了!

转染产品知多少:转染试剂选择工具收录于话题转染是将核酸导入真核细胞中的过程,是细胞生物学、基因表达和基因***实验中的关键步骤。不同的实验方案和技术差别巨大,我们可以利用化学方法或脂质体将核酸(DNA或RNA)高效输送到细胞内,也可以使用电穿孔方法利用电流在细胞膜上开孔,使核酸进入细胞内。赛默飞提供了多种高质量的转染产品,适用于各种细胞类型的转染。如何选择**受信赖的可用于转染的系统,是实验结果的重要影响因素。

.在多种不同类型细胞中基因敲除效率超过90%。

高灵活应用, 同一试剂可用于siRNA和质粒共转染的基因沉默实验。

细胞毒性低,结果相关性好,确保所观察到的细胞效应是由转染的siRNA而非转染过程本身介导。

兼容含血清或不含血清的培养基,转染前后均无需换液(如无血清培养基)。

X-tremeGENE siRNA Transfection Reagent用于4种细胞系的HPRT基因沉默实验。根据各试剂说明书建议的操作流程,或标准实验方法,将100nM HPRT特异性siRNA转染至4种细胞,通过LightCycler® h-HPRT Housekeeping Gene Set的荧光定量法评估基因沉默效率。结果显示用罗氏这款试剂在四种细胞中转染后基因沉默表现均表现优异。 并更换培养基,继续培养24 h后收取细胞,用PBS洗涤3次以上,以备RNA抽提。

原代细胞直接分离自组织并在适当条件下增殖,因此,它们的形态学和生理特征和体内状态更为相似。但相对于连续细胞系,它们通常更难培养和转染。在经过***次传代培养之后,原代培养物变成了一种细胞系。源自于原代培养物的细胞系具有有限的寿命(即它们是有限细胞系),且随着传代的进行,具有比较高的生长能力的细胞逐渐占据支配地位,从而造成了细胞群内的基因型和表型接近一致的情形。相对来说,这一类细胞要比原代细胞使用起来更为方便,尤其是稳定转染的克隆传代。转染复合物制备完成; 混匀后室温下孵育15-20分钟,直接取10μL加入已铺好细胞的孔中.神经细胞转染试剂

包括**常见的DNA,用于基因编辑的siRNA,能够更快表达蛋白的mRNA,CRISPR-Cas9甚至是体内转染。神经细胞转染试剂

细胞转染过程:X-tremeGENE 9 DNA 转染试剂   简介:

X-tremeGENE 9 DNA转染试剂是脂质和其它成分混合而得的一类多组份试剂,溶于80%乙醇中,经0.2 μm滤膜过滤,然后封装于玻璃小瓶中,适用于细胞分析的多种实验。

优势:1.具有细胞毒性极低、转染后细胞存活率高,生成可信任的生理学相关数据。

2.操作简便、节省时间,只需对X-tremeGENE 9 DNA转染试剂进行简单稀释,再与质粒DNA共同孵育,即可直接向细胞添加反应混合物(有无血清均可)。

3.对于常用细胞无需进行费时费力的优化工作。 神经细胞转染试剂

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