胞因素用低代数的细胞293T细胞非常重要！！当然也要保证细胞状态特别好，没有细微污染，铺板均匀。饱满状态好的细胞才可以产生较高滴度的***哦！
载体系统在实验中**常见的慢***载体系统有三质粒系统、四质粒系统，当然使用三质粒系统的小伙伴居多，一定要选择成熟商业化的载体系统！载体构建和质粒抽提纯化我们要注意是否构建时导致质粒载体重组或某个部件缺失，或污染别的质粒、杂物?中抽纯化是否污染?要养成同时做阴性对照的习惯：建议目的基因载体和阴性对照GFP 载体是同一批，且建议每次包装都如此操作，要保证目的基因的表达载体构建纯化良好，质粒间比例得当，并且对质粒进行酶切验证. 并更换培养基，继续培养24 h后收取细胞，用PBS洗涤3次以上，以备RNA抽提。DNA转染试剂原理
在难转染细胞（原代大鼠动脉平滑肌细胞）转染效率的比较
图片由芝加哥大学肺和重症护理系的 Nickolai Dulin 博士友情提供
制备大鼠的动脉平滑肌原代细胞并用使用 LipoD293™试剂（左图）和 Lipofecatmine 2000（L2K, 右图）分别将 GFP 的 cDNA（pEGFP-N3）按照生产制造商的转染操作步转染至该细胞。转染 24 小时后，用尼康 Eclipse 2000 荧光显微镜检测 GFP 荧光，以此来评价转染效率。
对难转染细胞 LNCap 细胞转染效率的比较
图片由罗斯威尔公园**研究所（Roswell Cancer Institute）的 Lyn Gao 博士友情提供
上海慢病毒转染试剂选购赛默飞提供了多种高质量的转染产品，适用于各种细胞类型的转染。
X-tremeGENE9DNA转染试剂简介：X-tremeGENE9DNA转染试剂是脂质和其它成分混合而得的一类多组份试剂，溶于80%乙醇中，经0.2μm滤膜过滤，然后封装于玻璃小瓶中，适用于细胞分析的多种实验。优势：1.具有细胞毒性极低、转染后细胞存活率高，生成可信任的生理学相关数据。2.操作简便、节省时间，只需对X-tremeGENE9DNA转染试剂进行简单稀释，再与质粒DNA共同孵育，即可直接向细胞添加反应混合物(有无血清均可)。3.对于常用细胞无需进行费时费力的优化工作.
.在多种不同类型细胞中基因敲除效率超过90%。
2.高灵活应用， 同一试剂可用于siRNA和质粒共转染的基因沉默实验。
3.细胞毒性低，结果相关性好，确保所观察到的细胞效应是由转染的siRNA而非转染过程本身介导。
4.兼容含血清或不含血清的培养基，转染前后均无需换液(如无血清培养基)。
图4. X-tremeGENE siRNA Transfection Reagent用于4种细胞系的HPRT基因沉默实验。根据各试剂说明书建议的操作流程，或标准实验方法，将100nM HPRT特异性siRNA转染至4种细胞。 通过LightCycler® h-HPRT Housekeeping Gene Set的荧光定量法评估基因沉默效率。结果显示用罗氏这款试剂在四种细胞中转染后基因沉默表现均表现优异。 转染产品知多少:转染试剂选择工具.
细胞转染如果以上都没有问题，那么******重要的环节就是慢***质粒转染293T细胞了，转染效果直接影响着出毒效率，那么一款好的转染试剂在此时就是至关重要了！在这里给大家推荐一款性价比超高的转染试剂，美国Polysciences家的PEIMAX40K！PEIMAX40K（也称为游离碱PEI22K）是一种功能强大，值得信赖且经济高效的瞬时转染试剂。在HEK293和CHO表达系统中，能在96孔板至100L生物反应器范围内提供始终如一高效的基因表达。越来越多的研究人员和公司使用PEI来替代其他类型转染试剂，以获得他们所需要的优势。相较于其他类型转染试剂，使用自行制备的PEI转染试剂可以使总转染成本降低高达40％左右。ThomasM，etal（2005）研究数据表明，去乙酰化的PEI40000（PolyethylenimineMAX40000）体外质粒DNA转染效率提高21倍，小鼠体内靶向效率达到10000倍，随之肺部特异疗效显示增强1500倍。包括常见细胞类型、干细胞、原代细胞以及历来难转染的细胞类型）提供如此简便、高效的siRNA输送效果。上海慢病毒转染试剂选购
各种转染试剂成分分析.DNA转染试剂原理
Lipofectamine RNAiMAX转染试剂是先进、高效的siRNA输送解决方案。目前尚无其他siRNA转染试剂能够在***的细胞系中（包括常见细胞类型、干细胞、原代细胞以及历来难转染的细胞类型）提供如此简便、高效的siRNA输送效果。
高效
可在低siRNA浓度下获得优良的转染效果
相对于其他的siRNA转染试剂，Lipofectamine RNAiMAX 转染试剂可以获得更佳的基因***效果。同在10 nM和1 nM p53 siRNA下，Lipofectamine RNAiMAX转染试剂实现了更高的有效***细胞/未转染细胞比率，超过其他RNAi试剂。 DNA转染试剂原理
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