Tris缓冲体系广泛应用生物制剂研发与生产过程中,例如目前已上市的两款mRNA**疫苗均选用Tris/Tris-HCl作为其制剂缓冲体系,此外该缓冲体系还***用于抗体蛋白纯化等生物制剂生产环节。艾伟拓产品团队在此向您推荐一种操作简便且复现性较好的缓冲液配制方法:使用氨丁三醇(Tris)及盐酸氨丁三醇(Tris-HCl)固体粉末进行配制。使用时,可根据目标浓度及pH,计算并直接称取两种固体粉末混合,溶解定容,至于两种固体粉末的用量如何确认,您可以参考以下实验步骤以及艾伟拓实验室实测值,通过一个简单的预实验进行确认:1.分别配制目标浓度的Tris与Tris-HCl(这里以0.1mol/L为例)2.两种溶液分别取不同体积混合成相同体积(这里以100mL为例)的缓冲液,测定溶液pH.、摸索出两种溶液适宜比例后,根据计划配置的缓冲液体积,倒算两种固体粉末的用量。基于该方法,我们复现了Moderna的**mRNA疫苗中的Tris缓冲溶液,pH理论值为7~8,实测值为7.47(注:该实测值为溶液中*包含Tris/Tris-HCl,不含mRNA-LNP及其他辅料情况下的pH值)。该方法的优势是操作简便,只需称取及溶解两步,在外界温度及溶液浓度相同的情况下,复现性较好,且无需使用浓盐酸等严格受限的试剂。艾伟拓药用级氨丁三醇购买!湖北磷霉素氨丁三醇散价格
缓冲液的作用
缓冲液的作用是在有限的范围内调整溶液的pH值,使待测溶液的酸度符合分析方法所规定的范围,例如,苯酚在碱性介质及铁**钾存在下,可与4-氨基安替比林反应生成橙红色的安替比林染料,为了防止芳香胺类的干扰,以pH在10士0.2时**为适宜。为此,就需要在待测溶液中加入缓冲液,调整和控制待测溶液的pH为10.0士0.2。在实际工作中,有些分析人员由于不大了解缓冲液的作用机理,当所配制和使用的缓冲溶液与规定的数值不相符时,为使缓冲溶液达到要求,就用盐酸或氢氧化钠等强酸、强碱进行调节, 以为这样做可以使缓冲溶液尽快达到所需要的pH值,然而,结果却适得其反,这样的溶液pH值虽然调对了,可是它的缓冲体系却被破坏了,也就失去了缓冲的作用。
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注射级氨丁三醇是一种广泛应用于生物医药领域的缓冲盐,全称三(羟甲基)氨基甲烷,化学式C4H11NO3,白色结晶颗粒,CAS号:77-86-1,25°C下的pKa为8.06,常用于蛋白或核酸缓冲液,有效范围通常是pH7.0-9.2之间。注射级氨丁三醇被用于不同pH条件下的蛋白质晶体生长,注射级氨丁三醇也是蛋白质电泳缓冲液的主要成分之一,其在电泳缓冲液中与甘氨酸构成缓冲体系,稳定电泳过程中的pH。此外Tris还是制备表面活性剂、硫化促进剂和一些药物的中间物,注射级氨丁三醇也被用作滴定标准物。常见的注射级氨丁三醇缓冲液有Tris-HCl缓冲液、Tris-磷酸盐缓冲液以及多种衍生缓冲液,如TBS、TE等。
氨丁三醇作为甲醛清除剂,已有较为广泛的应用,且不限于生物医药领域。例如,国外有报道的**将氨丁三醇作为一种新型除醛剂应用在水泥砂浆或乳胶漆中,其报道的氨丁三醇去除甲醛的反应机理为:氨丁三醇与甲醛按1∶2物质的量比进行反应,该反应为可逆反应,反应**终产物为恶唑烷。
由于可电离脂质在LNP结构及功能上的重要性,短时间内很难将其替换。因此,为提高mRNA分子的稳定性,降低mRNA-LNP疫苗储存要求,延长其有效期,选择氨丁三醇缓冲液同时发挥pH调节剂与醛基清除剂的作用是一个值得尝试的方向。此外,参考已上市脂质体药物制剂***,通过添加抗氧化剂减少LNP制剂中可电离脂质的氧化,从而减少醛基的产生,或许也是一个值得借鉴的选项,如两性霉素B脂质体Ambisome®***中的α-生育酚等。
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本篇文章我们来介绍一下注射级氨丁三醇的应用案例吧!应用案例注射级氨丁三醇具体应用案例如下。①Moderna**核酸疫苗缓冲液(mRNA-1273,pH7.0-8.0)用途:mRNA-LNP复合体的缓冲液。成分mRNASM-102DMG-PEG2000DSPC胆固醇注射级氨丁三醇摩尔比-501038.51.5-②pH缓冲液(0.5M,pH7.6)用途:蛋白或者核酸的缓冲液。成分注射级氨丁三醇HCl(1N)H2O含量60.57g420ml加至1000ml③缓血酸铵注射液用途:酸碱平衡调节药。用于急性呼吸性、代谢性酸血症。成分注射级氨丁三醇(7.28%)葡萄糖液(5-10%)含量等量混合其他应用如卡前列素氨丁三醇注射液,造影剂(碘海醇、碘普罗胺等)。艾伟拓药用级氨丁三醇怎么购买。天津磷霉素氨丁三醇散好贵
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生物制剂领域常用缓冲液
生物制剂领域常用的缓冲液主要有磷酸、柠檬酸、碳酸、醋酸、巴比妥酸、Tris(三羟甲基氨基甲烷)等系统。生化实验或研究工作中要慎重地选择缓冲体系,因为有时影响实验结果的因素并不是缓冲液的pH值,而是缓冲液中的某种离子。如硼酸盐、柠檬酸盐、磷酸盐和三羟甲基甲烷等缓冲剂都可能产生不需要的化学反应。(1)硼酸盐:硼酸盐与许多化合物形成复盐、如蔗糖。(2)柠檬酸盐:柠檬酸盐离子容易与钙结合,所以存在有钙离子的情况下不能使用。(3)磷酸盐:在有些实验,它是酶的抑止剂或甚至是一个代谢物,重金属易以磷酸盐的形式从溶液中沉淀出来。而且它在pH7.5以上时缓冲能力很小。
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