传统的宽场荧光显微镜由于光散射的影响,只能够对大脑浅层的神经元或在离体组织上进行成像,共聚焦显微镜由于光损伤较大,一般也只用于离体钙成像。随着荧光显微镜技术的迅速发展,在体钙成像技术得到了蓬勃发展。双光子荧光显微镜能够在进行活动动物成像的时候实现高分辨率和高信噪比。例如,用双光子显微镜对海马树突棘的钙离子信号进行成像,研究神经元突触后长时程yizhi(Wangetal.,2000);观察活动小鼠运动皮层神经元在嗅觉选择任务中刺激相关电位(Komiyamaetal.,2010)等等。不过,这些实验还是需要对动物进行麻醉和固定,而神经科学领域很多研究更希望能够对自由活动的动物进行研究。钙成像显微镜由软件控制的电子对焦方式,让成像更加稳定清晰。美国inscopix钙成像供应商
双光子显微成像技术是近些年发展起来的结合了共聚焦激光扫描显微镜和双光子激发技术的一种新型非线性光学成像方法,采用长波激发,能对组织进行深层次成像。常用的比较好激发波长大多位于800-900nm,而水、血液和固有组织发色团对这个波段的光吸收率低,此外散射的激发光子不能激发样品,因此背景第,光损伤小,适用于在体检测。双光子荧光成像技术能准确定位细胞内置入的微电极位置,从而观察胞体、树突甚至单个树突棘的活性。研究者可完整的观察神经组织的gaofen辨荧光图像,甚至可以分辨神经细胞单个树突棘中的钙分布。美国光遗传钙成像哪里买钙信号在大脑皮层中更能反映神经元的活性,因此神经元钙信号的检测对研究大脑皮层功能至关重要。
钙成像具有以下几个优势:1.非侵入性:钙成像技术可以在活物细胞或组织中进行观察,无需破坏细胞或组织的完整性,因此是一种非侵入性的技术。2.高时空分辨率:钙成像技术可以实时观察细胞内钙离子的动态变化,具有较高的时空分辨率。可以捕捉到钙离子浓度的瞬时变化,揭示细胞内信号传导的快速过程。3.多样性:钙成像技术可以使用不同的荧光探针或基因工程技术,实现对不同类型的细胞或组织进行钙成像。可以根据需要选择适合的探针或方法,扩展应用范围。4.可定量分析:通过钙成像技术可以获得荧光信号的强度,可以进行定量分析,了解钙离子浓度的变化程度。可以通过比较不同条件下的钙成像结果,研究因素对钙离子信号的调控作用。5.可应用于多个领域:钙成像技术广泛应用于神经科学、细胞生物学、药理学等领域。可以研究神经元活动、细胞信号传导、细胞凋亡等生物过程,有助于揭示生物学机制和疾病发生及发展的过程。综上所述,钙成像技术具有非侵入性、高时空分辨率、多样性、可定量分析和广泛应用于多个领域等优势,成为研究细胞内钙离子动态变化的重要工具。
双光子荧光显微镜(Two-PhotonLaser-ScanningMicroscopy)。双光子显微成像技术是近些年发展起来的结合了共聚焦激光扫描显微镜和双光子激发技术的一种新型非线性光学成像方法,采用长波激发,能对组织进行深层次成像。常用的比较好激发波长大多位于800-900nm,而水、血液和固有组织发色团对这个波段的光吸收率低,此外散射的激发光子不能激发样品,因此背景第,光损伤小,适用于在体检测。双光子荧光成像技术能准确定位细胞内置入的微电极位置,从而观察胞体、树突甚至单个树突棘的活性。研究者可完整的观察神经组织的gaofen辨荧光图像,甚至可以分辨神经细胞单个树突棘中的钙分布。清醒动物脑功能钙成像的微型显微镜的研究在不断实践中。
Anderson研究团队发现实验室雄性小鼠对雌性和雄性的攀爬行为可以通过是否存在超声发声(USV)来区分。这些和更多的行为数据表明,大多数雄性主导的攀爬是攻击性的,尽管在极少数情况下可能是性行为。研究人员调查了USV+和USV-攀爬是否使用相同或不同的下丘脑神经基质。通过使用Inscopix自由行为显微钙成像方法观察内侧视前区(MPOA)或腹内侧下丘脑腹侧细分(VMHvl)中雌jisu受体1(ESR1)阳性神经元,发现在小鼠活动中可以解码出在USV+和USV-攀爬过程中神经元活动的独特模式。交叉光遗传刺激表达ESR1和囊状GABA转运蛋白(VGAT)的MPOA神经元,可促进USV+攀爬,并将雄性的定向攻击转换为USV攀爬。钙是模型动物神经细胞内重要的第二信使,参与细胞多种功能的调节,可以产生多种细胞内信号。深圳神经细胞钙成像采购信息
钙离子成像可以追踪神经元动作电位。美国inscopix钙成像供应商
一项由葡萄牙尚帕莫未知中心,牛津大学,哥伦比亚大学,荷兰鹿特丹伊拉斯谟大学,麻省理工学院,伦敦大学,德国MaxPlanck生物控制论研究所,德国图欧宾根大学多方合作的研究于2020年11月4日在Neuron上发表了题为TheAnteriorCingulateCortexPredictsFutureStatestoMediateModel-BasedActionSelection的文章,作者通过一个新的两步谜题任务了解基于模型的决策使用对行为具体后果的预测,在小鼠的一系列决策任务中使用Inscopix显微钙成像和光遗传学来证明前扣带皮层(ACC)预测了行动将导致的状态,而不仅*是预测它们是好是坏,并判断结果是否与这些预测相符。研究结果表明,ACC是基于模型的控制的关键节点,在预测所选操作的未来状态方面发挥着特定作用。美国inscopix钙成像供应商