常用抗体标记荧光染料的特性及其应用
1、FITC:激发波长488nm,比较大发射波长525nm。1)其标记的抗体适用于所有配备488nm氟离子激光器的流式细胞仪;2)在流式细胞仪的FL1通道检测;3)可用于荧光显微镜技术4)荧光强度易受PH值影响,PH值降低时其荧光强度减弱。2、AlexaFluor488:激发波长488nm,比较大发射波长519nm。1)其标记的抗体适用于所有配备488nm氟离子激光器的流式细胞仪:2)在流式细胞仪的FL1通道检测;3)具有超乎寻常的光稳定性,非常适用于荧光显微镜技术;4)在较宽的PH值范围内保持稳定(PH4~10)。5)南京星叶生物科技有限公司SuperFluor系列(效果同AlexaFluor系列)质优价廉,欢迎咨询。3、Cy3:激发波长488nm,比较大发射波长570nm。1)其标记的抗体适用于所有配备488nm氟离子激光器的流式细胞仪;2)在流式细胞仪的FL2通道检测:3)适用于荧光显微镜技术;4)为小分子染料,非常适合需小分子染料的流式细胞术,荧光强度低于PE。 DiD,DiO,DiI,DiR和DiS 染色的细胞可以分别用经典的FL1,FL2,FL3和FL4流式细胞仪检测。海南荧光染料Cy3
除了以上应用,吲哚菁绿还可以用于生物识别和药物输送。在生物识别中,吲哚菁绿可以与特定的生物分子结合,从而实现对这些分子的检测和定量分析。这项技术在生物医学研究和临床诊断中有着广泛的应用前景。此外,吲哚菁绿还可以作为药物输送系统的一部分,将药物包裹在其分子结构中,通过近红外光***释放药物,实现靶向***。吲哚菁绿作为一种多功能的荧光染料,在医学和生物领域具有广泛的应用前景。其绿色溶解度的优良性能,使其能够在水溶液中快速溶解,为其在医学影像学、光热***、生物识别和药物输送等方面的应用奠定了基础。随着科学技术的不断进步,相信吲哚菁绿在未来将发挥更大的潜力,为人类健康事业做出更大的贡献。吲哚菁绿作为一种荧光染料,在医学影像学中的应用是**为突出的。它可以通过静脉注射进入人体血液循环系统,并在近红外激光的照射下发出荧光信号。这种荧光信号可以被**的显像设备捕获和记录,从而形成高分辨率、高对比度的影像。这样的影像可以帮助医生观察和分析血管、淋巴系统以及**等病变的情况,提供重要的诊断依据。内蒙古荧光染料DIR荧光素的衍生物包括异硫氰酸荧光素、俄勒冈绿和羧基萘并荧光素等。
Hoechst33258是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料,对细胞的毒性较低。用于细胞核染色时,推荐的Hoechst33258工作浓度为0.5-10μg/ml。储存条件:-20℃干燥避光保存,有效期一年。注意事项:Hoechst33258对人体有害,请注意适当防护。荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽量当天完成检测。为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。抗荧光淬灭封片液(P0126)可以向碧云天订购。为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作注意事项:Hoechst33342对人体有一定刺激性,请注意适当防护。荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽量当天完成检测。为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
荧光染料标记蛋白或肽技术是一种常见的蛋白质体外标记技术。除了GFP等荧光蛋白的融合表达外,目标蛋白还可以通过荧光染料标记直接进行下游实验操作,如***跟踪、细胞分选等。
FITC荧光标记的原理是什么?
荧光标记所依赖的化合物称为荧光材料。荧光材料是指具有共轭双键系统化学结构的化合物。当受到紫外线或蓝紫光的照射时,它可以被刺激为刺激状态。当激发状态恢复到基本状态时,它会发出荧光。蛋白质荧光标记技术利用荧光材料的共价结合在目标分子的基团上,利用其荧光特性提供研究对象的信息。 南京星叶生物提供多种性价比高的各类活化荧光素,例如Cy系列、Super Fluor 系列(效果同Alexa Fluor系列)等。
注:建议对每只动物模型都需要建立荧光素酶动力学曲线,从而确定比较高信号检测时间和信号平台期。保存和操作的过程中都要避光。另外水溶性储存液过滤除菌后,可以-20℃或-80℃分装冻存,避免反复冻融。如果有条件,对储存液充氮气或氩气(防止氧化),稳定性和保存时间更长。 注射方式,动物类型以及体重等都会影响信号的发射,因此建议每次实验都要做荧光素酶动力学曲线,确定比较好信号平台期和比较好的检测时间。荧光素钾盐和荧光素钠盐应用上没有差别,两者的差别在于物理性状上如外形和溶解性。钠盐的水溶性高于钾盐。从目前发表的文献来看,钾盐的使用率远高于钠盐,尤其是体内实验。两者功效相同。 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。DAPI染色液(DAPI Staining Solution)常用于细胞核染色,可将细胞核染成蓝色。内蒙古荧光染料DIR
5(6)-FITC (Fluorescein 5(6)-isothiocyanate) 是一种胺活性衍生物的荧光染料.海南荧光染料Cy3
三、流式细胞仪分析1、取对数生长期的细胞,接种到孔板,过夜培养。2、如果要进行药物刺激,在细胞中加入感兴趣的药物进行干预,继续培养一定时间后,收集细胞,PBS清洗2次。3、加入Rhodamine123工作液重悬细胞,37℃避光孵育15min或更长时间。【注意】:由于细胞种类和实验体系不同,Rhodamine123工作液浓度和孵育时间可以根据预实验或参考文献自行调整。4、用流式细胞仪检测。
四、实验案例1、取对数生长期A549细胞接于六孔板(1*106+2mlDMEM培养基),37℃培养箱培养4-24h待其贴壁,以便后续实验操作.2、弃掉培养液,PBS洗涤两次.3、用培养基(无血清)稀释Rh123母液制备1~20µMRh123工作液。具体工作浓度取决于细胞类型和细胞浓度。4、将Rh123工作液加入六孔板并在37℃下孵育30分钟.5、去除Rh123工作液并用PBS洗涤三次细胞去除背景色.6、荧光显微镜观察. 海南荧光染料Cy3